老板终于同意我买一个新的分子筛啦，好鸡冻！
我决定从现在开始一定要好好做实验
做一个爱学习的宝宝
这个柱子真的蛮贵的，我要做好保养才可以，这样才能保持填料的寿命和性能的稳定。但是要怎么做保养呢？
别着急，今天小优就和大家分享一下分子筛保养（Tricorn型）的秘籍，我们一起来看看吧~
首次使用建议
1. 连接层析柱之前，检查系统管路、阀门已经排除气泡；确认顶端的接头已经锁住（locking ring（下图箭头所指黑色部分）已经按压下）；
2. 经过层析柱的所有溶液需要进行脱气并用0.22 μm滤膜过滤；
3. 设置系统报警压，注意不要超过层析柱耐受的最大压力（ 压力参数详见产品说明书）；
4. 低流速（建议以最大流速的一半流速）连接层析柱，注意液液相接；
5. 先用脱气的去离子水低流速平衡层析柱至少一个柱体积；
6. 再用平衡缓冲液低流速平衡层析柱至少一个柱体积。
运输和保存
1. 层析柱在运输中会接一个storage/shipping装置以防止层析柱干掉。柱子平衡于脱气的20%乙醇。
2. 在保存时，先用去离子水低流速平衡层析柱至少2-4个柱体积；
3. 再用脱气20%乙醇低流速平衡层析柱至少2-4个柱体积；
4. 最后连接storage/shipping装置，进行保存。
storage/shipping装置的使用
1. 怎样移除storage/shipping装置
1）向下按压spring-loaded cap；
2）移除locking pin；
3）松开cap然后旋开device。
2. 怎样填充storage/shipping装置
1）将注射器或泵与storage/shipping装置连接，填充20%乙醇到装置中，使液面高于标线。移除注射器或者泵；
2）敲打移除气泡，推动活塞至标线。
3. 怎样连接storage/shipping装置
1）将层析柱的入口和连接配件充满20%的乙醇，然后将填充好的storage/shipping装置drop-to-drop连接到层析柱的顶端；
2）安装spring-loaded cap；
3）插入locking pin固定。
常见问题处理
1. 层析柱进气
可能原因：环境温度变化，样品或缓冲液未经过脱气，层析柱连接系统时操作不当
处理方法：用大量脱气去离子水反向低流速冲洗层析柱，直到小气泡被带出（ 冲洗过程建议在系统连接反压阀之后进行）
2. 层析柱内填料干裂
可能原因：保存不当，层析柱漏液/漏气
处理方法：检查层析柱每个连接处，重新拧紧；更换密封圈O-ring ；用脱气去离子水低流速冲洗层析柱直到恢复；测定柱效或重复之前做过的样品，如果柱效变化不大或者对于样品分离的效果影晌不大，则继续使用；否则，建议更换层析柱。
3. 系统反压升高
可能原因：缓冲液及样品未进行过滤、蛋白沉淀和杂质残留、清洗不及时等引起系统在线滤器堵塞、层析柱滤膜堵塞；流速过快；流动相粘性过高；温度降低
处理方法：检查系统，检查在线滤器，从组分收样器开始拧开管线，观察压力变化后找到原因；清洗层析柱；更换层析柱顶端滤膜；移除层析柱顶端2 - 3 mm凝胶，调节adaptor消除顶端死体积。
4. 层析柱柱床胶面下降
可能原因：流速过快，未设置报警压而超压；层析柱干裂
处理方法：长时间低流速反向冲洗层析柱，直到工作流速下胶面恢复adaptor消除顶端死体积；测定柱效或重复之前做过的样品，如果柱效变化不大或者对于样品分离的效果影响不大，则继续使用；否则，建议更换层析柱。
层析柱的清洗
3-5次实验后，请注意清洗层析柱。
1. 常规清洗
1）0.5M NaOH或0.5 M乙酸低流速反向清洗1-1.5个柱体积；
2）立即用平衡缓冲液低流速反向冲洗层析柱至少2个柱体积；
3）依次用去离子水和20%乙醇低流速反向冲洗及保存层析柱；
4）下次实验前，低流速平衡层析柱直至UV及pH信号稳定。
2.强力清洗
1）1M NaOH低流速反向清洗4个柱体积以清除蛋白沉淀，再用脱气去离子水冲洗至少4个柱体积（去除蛋白沉淀、疏水蛋白、脂蛋白等）；
2）30%异丙醇低流速反向清洗1.5个柱体积，再用去离子水冲洗至少2个柱体积（去除脂类及疏水性极强的蛋白等）；
3）上样1个柱体积的1mg/ml 胃蛋白酶溶液（溶于0.1 M乙酸，0.5 M氯化钠），室温过夜或者37度处理1小时，再按照常规清洗方法清洗（去除蛋白沉淀等）；
4）根据不同的样品，可选用其它化学试剂（ 具体可参考层析柱说明书中化学试剂耐受表）
5）下次实验前，低流速平衡层析柱直至UV及pH信号稳定。
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